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總蛋白測定試劑盒(雙縮脲法)試劑空白吸光度(空白吸光度)檢測項目報價???解決方案???檢測周期???樣品要求? |
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總蛋白測定是臨床生化檢驗中的常規項目,其檢測結果對評估肝功能、營養狀態及腎臟疾病具有重要意義。雙縮脲法作為一種經典的蛋白定量方法,憑借其操作簡便、特異性高和成本低廉的特點,在實驗室中廣泛應用。試劑空白吸光度(空白吸光度)是該方法質量控制的關鍵參數,反映了試劑本身的背景干擾水平。通過測定空白吸光度,可排除試劑中顯色物質、雜質或保存條件變化對檢測結果的干擾,確保檢測數據的準確性和重復性。尤其在試劑批次更換或儀器校準過程中,空白吸光度的監測尤為重要。
試劑空白吸光度檢測的核心目標是量化試劑本身在特定波長下的吸光值。主要關注以下參數:
1. 空白吸光度絕對值:在540nm波長下,試劑與去離子水混合后的吸光值,通常要求≤0.15(具體標準因試劑品牌而異);
2. 批次間差異:不同生產批次的試劑空白吸光度波動范圍;
3. 穩定性驗證:試劑開封后隨時間推移的空白吸光度變化趨勢。
檢測過程需依賴儀器設備:
- 分光光度計:需具備540nm波長檢測功能,光路系統需定期校準;
- 恒溫孵育系統:控制反應溫度于37±0.5℃(部分試劑要求室溫反應);
- 精密移液器:建議使用±1%精度的微量移液器;
- 比色皿:光徑1cm的石英或光學玻璃比色皿,需無劃痕、清潔無污染。
依據《WS/T 347-2011 雙縮脲法測定血清總蛋白》標準,空白吸光度檢測流程如下:
1. 試劑準備:將試劑恢復至室溫,按說明書比例與去離子水混合;
2. 空白管設置:取3ml工作試劑加入比色皿,以去離子水為參比;
3. 儀器校準:預熱分光光度計30分鐘,測試前用參比液調零;
4. 吸光度測定:在540nm波長下連續讀取3次吸光值,取均值作為終結果;
5. 數據記錄:記錄環境溫度、試劑批號及儀器型號等關聯信息。
根據行業規范,合格標準應滿足:
- 基線吸光度:未加樣本時吸光值應≤0.15(具體參考試劑說明書);
- 重復性要求:同一試劑三次測定結果差異應<±0.02;
- 異常處理:若空白吸光度超過閾值,需排查試劑變質、比色皿污染或儀器故障等因素。部分高靈敏度試劑可能要求更嚴格的≤0.10標準。
實際檢測中需注意:
- 試劑儲存異常:避光不當可能導致顯色劑分解,需檢查試劑外觀;
- 水質不合格:建議使用新鮮制備的超純水(電阻率≥18.2MΩ·cm);
- 儀器基線漂移:可通過重復調零或更換光源燈管進行校正;
- 操作誤差:需嚴格統一比色皿裝入液量(建議使用定量加樣器)。