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流式液相多重蛋白定量試驗檢測項目報價???解決方案???檢測周期???樣品要求? |
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流式液相多重蛋白定量試驗檢測是一種結合流式細胞術與液相芯片技術的高通量蛋白質分析手段,廣泛應用于臨床診斷、生物醫學研究和藥物開發領域。該技術通過熒光編碼微球或納米顆粒作為載體,結合特異性抗體或探針,可在同一反應體系中同時檢測數十至數百種目標蛋白的濃度,具有高靈敏度、高特異性和低樣本消耗量的特點。其核心優勢在于突破了傳統ELISA等單指標檢測的局限性,尤其適用于復雜生物樣本(如血清、細胞裂解液)中多種蛋白質的動態監測和生物標志物譜分析。
流式液相多重蛋白定量試驗主要針對以下檢測項目:
1. 細胞因子(如IL-6、TNF-α、IFN-γ等)
2. 炎癥標志物(CRP、SAA、MMP-9等)
3. 腫瘤標志物(CEA、CA19-9、PSA等)
4. 免疫球蛋白及補體系統蛋白
5. 信號通路關鍵蛋白(如磷酸化蛋白)
檢測項目可根據研究需求進行定制化組合,支持跨炎癥、腫瘤、免疫等領域的多維度分析。
核心檢測設備包括:
1. 流式細胞儀:配備多激光系統(如488nm、635nm)和高靈敏度PMT檢測器
2. 液相芯片分析系統(如Luminex xMAP平臺)
3. 高通量微孔板振蕩孵育系統
4. 自動化洗板機
儀器需具備多色熒光檢測能力(如FITC、PE、APC等),支持微球區域識別和信號解卷積。
標準操作流程包括:
1. 樣品預處理:血清/血漿離心去雜質,細胞裂解液定量標準化
2. 微球-抗體偶聯:將不同熒光編碼微球與捕獲抗體共價結合
3. 抗原-抗體反應:37℃震蕩孵育1-2小時形成復合物
4. 檢測抗體標記:生物素化二抗與鏈霉親和素-熒光染料結合
5. 流式檢測分析:通過微球熒光編碼識別檢測項目,報告熒光強度量化蛋白濃度
6. 數據解析:使用專用軟件(如xPONENT)生成標準曲線并計算濃度
實驗需遵循以下標準體系:
1. ISO 13485:體外診斷醫療器械質量管理規范
2. CLSI EP17-A2:檢測限的確定與驗證指南
3. MIQE指南:多重檢測實驗的標準化要求
4. 藥監局《流式熒光發光免疫分析試劑技術審查指導原則》
關鍵質控指標包括:標準曲線R2值≥0.98;批內CV<10%;回收率85-115%;檢測靈敏度達pg/mL級別。
流式液相多重蛋白定量技術通過創新的檢測體系和標準化操作流程,為醫學提供了強有力的工具支持。隨著多組學研究的深入和臨床診斷需求的提升,該技術將在個體化醫療、疾病機制解析等領域發揮更重要的作用。實驗過程中需嚴格把控儀器校準、試劑驗證和質控管理,確保檢測結果的準確性與可重復性。