遲發(fā)性超敏發(fā)應(yīng)檢測(cè)

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遲發(fā)性超敏反應(yīng)檢測(cè)概述

遲發(fā)性超敏反應(yīng)（Delayed-Type Hypersensitivity, DTH）是機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)特定抗原產(chǎn)生的IV型超敏反應(yīng)，主要由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)，通常在接觸抗原后24-72小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)炎癥反應(yīng)。這種反應(yīng)與過敏性疾病、自身免疫病、感染性疾病（如結(jié)核病）及疫苗接種后的免疫應(yīng)答密切相關(guān)。檢測(cè)DTH不僅有助于評(píng)估細(xì)胞免疫功能狀態(tài)，還能輔助診斷接觸性皮炎、結(jié)核感染等疾病，并為器官移植排斥反應(yīng)的監(jiān)測(cè)提供依據(jù)。其檢測(cè)的核心在于通過特異性抗原刺激，觀察局部組織或血液中免疫細(xì)胞的反應(yīng)強(qiáng)度。

檢測(cè)項(xiàng)目

遲發(fā)性超敏反應(yīng)的檢測(cè)項(xiàng)目主要包括：結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)（TST）、斑貼試驗(yàn)、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)（LTT）以及細(xì)胞因子檢測(cè)（如IFN-γ釋放試驗(yàn)）。TST通過皮內(nèi)注射結(jié)核菌純蛋白衍生物（PPD），觀察硬結(jié)大小判斷結(jié)核感染或疫苗接種后的免疫記憶；斑貼試驗(yàn)用于檢測(cè)接觸性過敏原；LTT和細(xì)胞因子檢測(cè)則通過體外培養(yǎng)淋巴細(xì)胞，分析其增殖能力或分泌的炎癥因子水平。

檢測(cè)儀器

DTH檢測(cè)涉及多種精密儀器：
1. 酶標(biāo)儀：用于ELISA法檢測(cè)血清或培養(yǎng)液中的細(xì)胞因子（如IFN-γ、IL-2）；
2. 流式細(xì)胞儀：分析淋巴細(xì)胞亞群及活化標(biāo)志物（如CD4+/CD8+比值）；
3. 熒光顯微鏡：觀察組織活檢標(biāo)本中的炎性細(xì)胞浸潤；
4. PCR儀：檢測(cè)抗原特異性T細(xì)胞受體基因表達(dá)；
5. 皮試測(cè)量尺：精確測(cè)量皮膚硬結(jié)直徑（如TST結(jié)果判定）。

檢測(cè)方法

常用檢測(cè)方法分為體內(nèi)和體外兩類：
體內(nèi)檢測(cè)法：包括經(jīng)典的皮內(nèi)注射試驗(yàn)（如TST）和斑貼試驗(yàn)，直接觀察局部紅腫、硬結(jié)等反應(yīng)；
體外檢測(cè)法：
- 淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)：通過3H-TdR摻入法或CFSE染色法量化T細(xì)胞增殖；
- ELISpot技術(shù)：檢測(cè)單個(gè)細(xì)胞分泌的IFN-γ斑點(diǎn)；
- 多重液相芯片技術(shù)：同時(shí)分析多種細(xì)胞因子的表達(dá)譜。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

DTH檢測(cè)需遵循和國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)：
1. 結(jié)核菌素試驗(yàn)：依據(jù)WHO《結(jié)核感染診斷指南》，硬結(jié)直徑≥5mm為陽性；
2. 斑貼試驗(yàn)：采用接觸性皮炎研究組（ICDRG）評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)；
3. IFN-γ釋放試驗(yàn)：參照美國CDC和CLSI指南，以抗原刺激后的IFN-γ濃度≥0.35 IU/mL為臨界值；
4. 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制：符合ISO 15189醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可要求，確保試劑批間差＜15%，重復(fù)性CV值＜10%。

通過規(guī)范化的檢測(cè)流程和標(biāo)準(zhǔn)化的結(jié)果判讀，遲發(fā)性超敏反應(yīng)檢測(cè)可為臨床提供可靠的免疫狀態(tài)評(píng)估依據(jù)，尤其在結(jié)核病篩查、過敏原診斷及免疫功能監(jiān)測(cè)中具有不可替代的價(jià)值。